1.2.2 色素提取与HPLC分析条件准确称取0.100g样品于预先冷却的研钵中,加入80%丙酮水溶液(-4℃)2mL研磨至匀浆状,经冷冻离心(-20℃,4000r/min,10min)后转移上清液。
本研究无重大的方案违反事件。既往研究显示，含乳糖饮食可以有效提高钙质吸收，相反地，无乳糖饮食会降低钙质吸收率。
这提示乳糖酶滴剂在早产儿中的使用是安全的。因此，尚需进一步研究获得更充足的证据来证实本研究结论。当乳糖酶分泌不足或缺乏时，摄入体内的乳糖无法被完全分解，未被分解的乳糖直接进入大肠，经大肠菌群的发酵作用，产生气体和酸，出现一种或多种临床不适表现，如腹泻、腹痛、腹胀等，称之为乳糖不耐受。2.5 两组患儿生长发育相关指标的比较入组时两组患儿体重和头围的比较差异无统计学意义（P0.05）。对所有退出研究患儿进行病例回顾，亦未发现与乳糖酶滴剂或益生菌存在关联的不良反应。
干预后第2周末再次检测血清钙和血清磷水平，两组比较差异亦无统计学意义（P0.05）。本研究中乳糖酶滴剂添加喂养1周后，乳糖不耐受部分症状得到缓解，但粪便性状及还原糖水平未见明显差异。2.7 工作曲线与检出限按本实验方法配制硒的标准系列溶液，测定其荧光强度，并对数据进行回归分析。
由表3可见，采用上述的标准曲线和样品处理、测定方法，测定的不同批次的4袋植物硒盐中硒含量数据也稳定，测定结果间偏差很小。对空白溶液进行连续20次测量其吸光度值，以3sb/K计算(sb为空白测定的标准偏差，K为校准曲线的斜率)检出限，本方法的检出限为0.125g/L。正常植物硒盐按本方法处理后的样液浓度应在12～32g/L之间，落在方法校正曲线范围(0～50g/L)之内。2.6 硒标准系列溶液的质量浓度选择植物硒盐是以食盐为载体，添加植物来源的有机硒，按照GB 28050-2011《食品安全国家标准预包装食品营养标签通则》要求，食品宣称含硒条件的硒含量要求大于等于75g/kg，宣称富硒条件的硒含量要求大于等于150g/kg，若按照GB5009.93-2017的浓度绘制硒标准曲线，则植物硒盐中硒的荧光强度不在标准曲线范围内，由此会给检测结果引入较大误差
2012年前食盐中测定无机硒含量的方法一般采用荧光光度法，如DB41/T271-2001《硒盐》中的二氨基联苯胺分光光度法以及GB/T 5009.93-2003《食品中硒的测定》中的2,3-二氨基萘荧光法，这两种方法取样量大，分析周期长，消耗试剂多，且采用有机溶剂甲苯或环己烷萃取，有污染，对人体危害大，操作也繁琐。铁氰化钾溶液（100g/L）:称取10g铁氰化钾，溶于100m L水中，混匀。
盐酸溶液（6mol/L）：量取50m L盐酸，缓慢加入40m L水中，冷却后用水定容至100m L，混匀。1.2 原子荧光光度计仪器参数负高压260V，灯电流70m A，原子化温度800℃。硝酸-高氯酸混合酸（9+1）：将900m L硝酸与100m L高氯酸混匀。世界卫生组（WTO）公布，硒是人体必需的14种微量元素之一，参与机体的抗氧化，硒缺乏是克山病发病的重要危险因素。
1.3.2 样品处理、测定与计算称取样品2g左右（精确到0.001g）于100m L锥形瓶中，加入10m L超纯水，再加入20m L硝酸-高氯酸混合酸（9+1）及几粒玻璃珠，混合均匀，于锥形瓶颈部加上小漏斗，于200℃～250℃加热板上消解至8～10m L溶液，加入5m L盐酸溶液（6mol/L），继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现，冷却，转移至25m L比色管中，加入2.0m L浓盐酸，1.0m L铁氰化钾（100g/L），用水定容，混匀待测。硒标准中间液（5g/m L）：准确吸取5.0m L硒标准溶液于100m L容量瓶中，用（5+95）盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，备用。相关链接：硒，硝酸，超纯水。试剂除特别注明外均为分析纯，水为超纯水，盐酸优级纯，硒标准溶液100g/m L（中国计量科学研究院），植物硒盐（重庆某某制盐化工有限公司）。
以硼氢化钾溶液（20g/L）为还原剂，盐酸溶液（5+95）为载流，连续用标准系列的零管进样，待读数稳定之后，将硒标准系列溶液按质量浓度由低到高的顺序分别导入仪器，测定其荧光强度，以质量浓度为横坐标，荧光强度为纵坐标，制作标准曲线。1 材料与方法1.1 仪器与试剂AFS-230E双道原子荧光光度计（北京海光仪器有限公司）、硒空心阴极灯（北京海光仪器有限公司）、电加热板（北京莱伯泰科仪器股份有限公司），所有玻璃器皿及聚四氟乙烯消毒内罐先用去污剂洗净再用硝酸溶液（1+5）浸泡过夜，使用前用超纯水（UP水）冲洗干净，干燥，备用。
我国是一个缺硒大国，据《中华人民共和国地方疾病与环境因素图集》揭示，从东北三省起斜穿至云贵高原，占我国国土面积的72%地区存在一条低硒地带，其中30%为严重缺硒地区。硒标准使用液（250g/m L）：准确吸取5.0m L硒标准溶液于100m L容量瓶中，用（5+95）盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，备用。
随着植物源有机硒引入食盐中，无机硒的测定方法已不适用于测定植物硒盐中硒含量，本实验在GB 5009.93-2017《食品安全国家标准食品中硒含量的测定》第一法氢化物原子荧光光谱法基础上进一步细化实验参数或操作，以求采用氢化物原子荧光光谱法精准测定植物硒盐中硒含量。氢氧化钠溶液（5g/L）：称取5g氢氧化钠，溶于1000m L水中，混匀。炉高8mm，载气流速500m L/min，屏蔽气流速1000m L/min，延迟时间1s，读数时间14s，加液时间8s，进样体积2m L。2012年因GB 14880-2012《食品安全国家标准食品营养强化剂使用标准》的颁布于实施，添加亚硒酸钠等无机硒的硒盐逐步退出市场，而国内部分制盐企业已开始利用植物源有机硒开展植物硒盐的研究、开发、生产，并上市销售。硼氢化钾溶液（20g/L），称取20g硼氢化钾，溶于1 L0.5%的氢氧化钠溶液中，混匀。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除。
测量方法为标准曲线法，读数方式为荧光强度值。盐酸溶液（5+95），量取25m L优级纯浓盐酸，缓慢注入到475m L水中，混匀。
硒是介于金属与非金属之间的化学元素，硒在地壳中的含量非常稀少。按1.2仪器工作参数上机测量，在与测定标准系列溶液相同的实验条件下，将空白溶液和试样溶液分别导入仪器，测其荧光值强度，与标准系列比较定量。
1.3 操作步骤1.3.1 标准曲线的绘制分别准确吸取硒标准使用液0.00m L、1m L、2m L、3m L、4m L、5m L、6m L于25m L比色管中，加适量水，分别加入2.0m L浓盐酸，1.0m L铁氰化钾溶液（100g/L），用水稀释至刻度，摇匀，待测。全世界有四十多个国家和地区属于缺硒地区。
2 结果与讨论2.1 以重庆某某制盐化工有限公司生产的同一批次号的同一袋植物硒盐作为测试样品，按上述方法测定4个不同位点的硒含量，检测结果如下：声明：本文所用图片、文字来源《中国井矿盐》，版权归原作者所有。此硒标准系列溶液的质量浓度分别为0g/L、10g/L、20g/L、30g/L、40g/L、50g/L按1.2仪器工作参数上机测量。GB 5009.93-2017《食品安全国家标准食品中硒含量的测定》第一法氢化物原子荧光光谱法适用于测定各类食品中的硒含量，而该方法适用范围广，实验参数或操作需根据被测物做相应细化研究。植物硒盐中硒含量按式（1）计算：式中：X植物硒盐中硒的含量，单位为毫克每千克（mg/kg);植物硒盐溶液中硒的质量浓度，单位为微克每升（g/L);0空白溶液中硒的质量浓度，单位为微克每升（g/L);V植物硒盐消化液总体积，单位为毫升（m L);m植物硒盐称样量，单位为克（g);1000换算系数
植物硒盐中硒含量按式（1）计算：式中：X植物硒盐中硒的含量，单位为毫克每千克（mg/kg);植物硒盐溶液中硒的质量浓度，单位为微克每升（g/L);0空白溶液中硒的质量浓度，单位为微克每升（g/L);V植物硒盐消化液总体积，单位为毫升（m L);m植物硒盐称样量，单位为克（g);1000换算系数。世界卫生组（WTO）公布，硒是人体必需的14种微量元素之一，参与机体的抗氧化，硒缺乏是克山病发病的重要危险因素。
2 结果与讨论2.1 以重庆某某制盐化工有限公司生产的同一批次号的同一袋植物硒盐作为测试样品，按上述方法测定4个不同位点的硒含量，检测结果如下：声明：本文所用图片、文字来源《中国井矿盐》，版权归原作者所有。GB 5009.93-2017《食品安全国家标准食品中硒含量的测定》第一法氢化物原子荧光光谱法适用于测定各类食品中的硒含量，而该方法适用范围广，实验参数或操作需根据被测物做相应细化研究。
试剂除特别注明外均为分析纯，水为超纯水，盐酸优级纯，硒标准溶液100g/m L（中国计量科学研究院），植物硒盐（重庆某某制盐化工有限公司）。盐酸溶液（6mol/L）：量取50m L盐酸，缓慢加入40m L水中，冷却后用水定容至100m L，混匀。
此硒标准系列溶液的质量浓度分别为0g/L、10g/L、20g/L、30g/L、40g/L、50g/L按1.2仪器工作参数上机测量。1.3.2 样品处理、测定与计算称取样品2g左右（精确到0.001g）于100m L锥形瓶中，加入10m L超纯水，再加入20m L硝酸-高氯酸混合酸（9+1）及几粒玻璃珠，混合均匀，于锥形瓶颈部加上小漏斗，于200℃～250℃加热板上消解至8～10m L溶液，加入5m L盐酸溶液（6mol/L），继续加热至溶液变为清亮无色并伴有白烟出现，冷却，转移至25m L比色管中，加入2.0m L浓盐酸，1.0m L铁氰化钾（100g/L），用水定容，混匀待测。以硼氢化钾溶液（20g/L）为还原剂，盐酸溶液（5+95）为载流，连续用标准系列的零管进样，待读数稳定之后，将硒标准系列溶液按质量浓度由低到高的顺序分别导入仪器，测定其荧光强度，以质量浓度为横坐标，荧光强度为纵坐标，制作标准曲线。我国是一个缺硒大国，据《中华人民共和国地方疾病与环境因素图集》揭示，从东北三省起斜穿至云贵高原，占我国国土面积的72%地区存在一条低硒地带，其中30%为严重缺硒地区。
按1.2仪器工作参数上机测量，在与测定标准系列溶液相同的实验条件下，将空白溶液和试样溶液分别导入仪器，测其荧光值强度，与标准系列比较定量。全世界有四十多个国家和地区属于缺硒地区。
炉高8mm，载气流速500m L/min，屏蔽气流速1000m L/min，延迟时间1s，读数时间14s，加液时间8s，进样体积2m L。硒标准使用液（250g/m L）：准确吸取5.0m L硒标准溶液于100m L容量瓶中，用（5+95）盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，备用。
硼氢化钾溶液（20g/L），称取20g硼氢化钾，溶于1 L0.5%的氢氧化钠溶液中，混匀。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系删除。